目的:研究促甲状腺激素受体(TSHR)在甲状腺相关眼病(TAO)患者球后脂肪和结缔组织中的基因表达和蛋白表达,确定TSHR在TAO发病机制中的作用。
方法:经眼眶减压术获得TAO患者球后脂肪与结缔组织标本11例,由非炎性肿瘤切除术中获得正常对照组的球后组织标本10例。提取组织总RNA,经RT-PCR产物电泳观察TSHRmRNA的表达。其中基因表达阳性者进行免疫组织化学染色,选择9例TSHRmRNA阳性表达的TAO患者球后脂肪和结缔组织标本和2例TSHRmRNA阳性表达的正常对照组的球后组织标本。上述标本经福尔马林固定,石蜡包埋,切片厚度为5μm,采用ABC染色法,显示TSHRmRNA基因蛋白产物,观察其蛋白表达。
结果:从TAO及对照组球后脂肪和结缔组织中提取总RNA,经RT-PCR括增TSHRmRNA片段,大小为521bp。11例TAO患者有9例检测到TSHRmRNA的表达,阳性检出率为91%。正常对照组10例,2例检测到TSHRmRNA的表达,阳性检出率为20%。二者相比,p=0.007(p<0.01)具有统计学差异。9例TAO患者有6例球后脂肪细胞膜呈棕黄色着色及脂肪间纤维结缔组织有棕黄色颗粒沉着,其TSHR蛋白的阳性表达率为66.7%。而其他3例TAO及2例正常对照组的球后脂肪及结缔组织均无TSHR蛋白的表达。
结论:TSHRmRNA在TAO患者球后脂肪和结缔组织中高度表达,且有TSHR蛋白表达,而正常个体没有表达,可以证实TAO患者球后组织中存在有活性的TSHR蛋白,提示TSHR可能作为交叉抗原在TAO发病机制中起重要作用。