目的
建立一种标准化的大鼠视神经不同程度部分损伤动物模型,特别对致伤强度和损伤程度以及它们之间的关系进行量化分析。
方法
用压力为148.0g的反向镊夹持大鼠视神经3秒、6秒、12秒、30秒、60秒或用压力为32.4g的微型动脉夹夹持大鼠视神经5秒、10秒、15秒建立不同程度视神经损伤的动物模型,用经颅荧光金逆行标记视网膜节细胞的方法观察损伤后1个月视网膜节细胞的变化,在电镜下计算轴突数目,以视网膜节细胞和轴突数目的变化衡量损伤程度,并用坚牢蓝经心脏灌注的方法评价该致伤模型中眼部血供的变化。
结果
用夹持力与时间的乘积即致伤冲量和单位面积视神经受到的致伤冲量即平均冲量能全面的反映致伤强度,荧光金逆行标记视网膜节细胞计数或电镜下轴突计数是衡量损伤程度的良好指标,但荧光金逆行标记视网膜节细胞计数要优于电镜下轴突计数。微型动脉夹夹持大鼠视神经15秒与反向镊夹持3秒的平均致伤冲量相等,引起的节细胞数目的变化也相似。荧光金逆行标记的正常视网膜节细胞的数目为(2195±195)mm-2,微型动脉夹夹持大鼠视神经5秒、10秒、15秒后4周节细胞的数目分别为(1527±74)mm-2、(1352±79)mm-2、(1180±72)mm-2;反向镊夹持大鼠视神经3秒、6秒、12秒、30秒、60秒后4周,荧光金逆行标记的节细胞的数目分别为(1135±79)mm-2、(1077±74)mm-2、(960±57)mm-2、(709±57)mm-2、(626±83)mm-2。随着致伤强度的增加,节细胞数目减少,视网膜节细胞的数目与致伤冲量之间呈幂函数曲线关系。随着致伤强度的增加,轴突的数目也表现出与视网膜节细胞同样的变化趋势。短时间的视神经夹持不会引起视网膜的缺血损伤。
结论
利用反向镊夹持的方法可以很简便地建立一种易于标准化的视神经部分损伤模型,该模型可以用冲量、平均冲量和视网膜节细胞计数的方法来评价。