目的 构建人血小板源性生长因子B链（PDGF-B）基因重组真核表达载体，为PDGF-B基因转染促进角膜内皮细胞损伤修复的临床实验研究打下良好的基础。方法 根据人β-NGF的全长基因序列设计合成一对特异性引物；采用逆转录聚合酶链反应从人胎盘mRNA中扩增出PDGF-B基因片段，将其插入真核表达载体PcDNA4构建成重组真核表达载体PcDNA4/PDGF-B;经测序和酶切对插入片段进行分析和鉴定。结果 PCR产物经琼脂糖电泳结果显示在预期位置有阳性条带；序列分析和酶切结果证实插入片段序列正确。结论 人PDGF-B基因重组真核表达载体PcDNA4/PDGF-B构建成功，为角膜内皮细胞的转基因研究，在基因水平改变角膜内皮细胞的遗传性状从根本上解决角膜内皮细胞损伤修复的问题打下基础。
关键词 血小板源性生长因子；重组载体；酶切；序列分析