目的:观察结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜(periretinal membranes)中、培养的人视网膜色素上皮细胞(RPE)中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法: 用鼠抗人角蛋白(pan-cytokeratin)单克隆抗体,鼠抗人巨噬细胞单克隆抗体(HAM-56)和鼠抗人胶质细胞酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)单克隆抗体分别标记上皮细胞、巨噬细胞、神经胶质细胞,采用SABC免疫组织化学和免疫荧光双标记法,对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜、培养的人RPE细胞、正常人眼球标本进行CTGF蛋白的检测。结果: 免疫组化显示43例PVR增生膜中31例标本染色阳性,其中17例C2~C3级膜中12例阳性,染色反应为阴性“-”、弱阳性“+”、阳性“2+”和强阳性“3+”的分别有5、3、6和3例,总阳性率为70.6%。26例D1~D3 级膜中19例阳性, “-”、 “+”、“2+”和 “3+”的分别有7、5、8和6例,总阳性率为73.1%。PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角型,胞浆丰富的上皮样细胞,也有小部分阳性细胞呈梭形、胞体较大的成纤维细胞样细胞。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级间无相关(P>0.05)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE;正常人眼球RPE不表达CTGF;培养的RPE细胞在脂多糖、转化生长因子β1(TGF-β1)的刺激下CTGF表达阳性。结论:正常RPE不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达显著上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。
【关键词】 结缔组织生长因子(CTGF);视网膜色素上皮细胞(RPE);视网膜增生膜;免疫组化;免疫荧光双标记;增生性玻璃体视网膜病变(PVR)