目的 探讨过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)在糖尿病大鼠白内障形成中的损伤作用及葛根素(puerarin)的抗损伤作用。 方法 随机选体重250g的健康雄性SD大鼠72只、腹腔注射链脲佐菌素(STZ,45mg/kg),复制糖尿病大鼠白内障动物模型。分为对照组24只、STZ组24只、治疗组24只(应用葛根素腹腔注射)。用裂隙灯显微镜观察晶体形态变化;用流式细胞仪(FCM)检测晶体上皮细胞凋亡细胞数和凋亡细胞百分率;同时检测过氧亚硝基阴离子的标志物 — 硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NT)阳性细胞的荧光强度和阳性细胞数;用免疫印迹(Westren blot)法检测NT在晶体中的表达。 结果 大体观察:在实验20 天时,治疗组与对照组大鼠晶体完全透明。STZ组除晶体周边皮质密集空泡外,部分皮质片状混浊;在实验40天时,治疗组晶体周边皮质散在细小空泡,部分晶体周边皮质成环状密集中等空泡,STZ组除以上表现外,晶体核及核周皮质混浊;在实验60天时,治疗组晶体周边皮质散在的细小空泡几乎消失,晶体周边皮质成环状密集的中等空泡明显变小;STZ组除晶体核及核周皮质混浊外,部分晶体完全混浊。对照组大鼠晶体始终透明。FCM观察: 对照组细胞可见极轻微凋亡,治疗组在第20 天时可见细胞轻微凋亡;治疗组在第40 天时可见明显细胞凋亡但至60天时呈减弱趋势。NT阳性细胞的荧光强度和阳性细胞数与之一致。而STZ组随时间延长细胞凋亡加重。Westren blot法检测:对照组可见极微弱表达,治疗组在第20 天时可见微弱表达,在第40 天时表达强度增强但至第60天时表达强度减弱;STZ 组各期均有NT 的表达,且呈由弱到强的趋势。计算机图像分析表明,治疗组各期与STZ 组各期比较差异有非常显著意义(P < 0.01)。 结论 ONOO- 参与介导糖尿病大鼠白内障形成,是白内障氧化发病机制不可忽略的成员之一。葛根素具抗氧化作用,对于治疗早期糖尿病大鼠白内障效果明显。
[ 关键词 ] 糖尿病 白内障 过氧亚硝基阴离子 氧化 葛根素
通信作者:郝丽娜 河北省石家庄市桥西区长丰路13号3号楼 邮编 050011
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