目的 探讨光动力效应对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞的抑制作用规律及其作用机制。 方法 1、应用不同浓度(39.0625 ng/ml、78.125 ng/ml、156.25 ng/ml、312.5 ng/ml、625 ng/ml、1250ng/ml、2500ng/ml)光敏剂BPD和不同能量(1.2J/cm2、2.4J/cm2和3.6J/cm2)的689nm半导体激光组合,对人Tenon囊成纤维细胞进行光动力疗法(photodynamic therapy, PDT)处理,同时设MMC对照组、激光对照组、BPD对照组及空白对照组,然后用MTT法测各组光吸收值(OD值),分别计算各组抑制率。2、观察成纤维细胞在PDT处理后4小时的电镜下细胞超微结构的改变。3、流式细胞仪检测成纤维细胞PDT处理后4、8、24及36小时的各细胞周期比例的改变及凋亡细胞的比例。结果 1、光动力效应对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞有明显抑制作用,三种照光能量的IC50分别为192.068ng/ml、114.142ng/ml和91.970ng/ml;各光动力效应组与空白对照组间有统计学差异,照光能量为1.2J/cm2时,各组成纤维细胞抑制率分别为11.62%、26.13%、47.68%、74.05%、88.08%、90.76%和92.54%,照光能量为2.4J/cm2时,各组抑制率为12.5%、41.6%、66%、87.1%、90.3%、91.0%和93.3%,照光能量为3.6J/cm2时,各组抑制率为21.97%、48.54%、78.37%、86.52%、91.85%、91.85%和94.85%;激光对照组对细胞增殖无影响;高浓度光敏剂(2500ng/ml)对细胞有抑制作用,其余浓度对细胞增殖无影响;要达到体外最大抑制效果,成纤维细胞的最佳的参数组合为 BPD浓度156.25ng/ml及激光能量3.6J/cm2。 2、电镜结果显示PDT杀伤细胞的主要形式是诱导细胞凋亡,但也有少量的坏死存在。3、流式细胞仪结果显示处于S期的细胞对BPD介导的光动力效应最敏感,PDT处理后S期细胞的比例明显减少;凋亡细胞的比例随PDT处理后时间推移逐渐增加。结论 光动力效应对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制作用大小随光敏剂浓度和激光能量的增加而增加,最佳的参数组合为 BPD浓度156.25ng/ml及激光能量3.6J/cm2,PDT杀伤细胞的主要形式是诱导细胞凋亡。
本文受广东省卫生厅基金(编号:B1999064)资助