目的：克隆和筛选与慢性高眼压视网膜损害相关的基因表达片段。
方法：
1. 通过甲基纤维素注入兔眼前房的方法建立兔高眼压模型。
2. 5周后，取视网膜组织分别做光镜、电镜切片，进行形态学观察,取视神经做视神经纤维的分析，验证动物模型是否成功。
利用抑制性消减杂交技术进行慢性高眼压视网膜组织差减文库的构建及初步筛选。
4. 采用原位杂交的方法进行兔慢性高眼压视网膜损害相关基因片段的细胞定位。
结果：
1. 眼压测量发现实验眼眼压保持在28-35mmHg，时间持续5周。
2．光镜及电镜观察发现实验组视网膜及神经纤维变化与慢性青光眼的病理变化相同。
3. 提取的视网膜总RNA及纯化后mRNA符合进一步实验的要求。消减效率分析消减效果较好。构建差减文库和进行初步筛选后，共发现118个阳性克隆。将此结果进行斑点杂交，筛选出有明显差异的41个克隆，根据差异的显著性选择19个片段进行测序，得到有效序列16个，将这些阳性序列在NCBI-BLAST中比对发现其中2个有高度同源序列（高于90%），2个未发现同源（相似性高于90%）。
4．筛选出的一个已知基因片段（编号F9）与Rap和Rab家族基因相似性高达99%。将F9片段标记生物素作为探针进行视网膜组织原位杂交，确定其大量表达于实验组视网膜组织中的神经节细胞及内核层细胞，而对照组视网膜组织不表达。
结论：
1. 在兔眼前房重复注入甲基纤维素，建立了兔慢性高眼压模型。该方法操作简便，高眼压时间易于控制。
2. 经光镜及电镜观察发现，该模型造成的视网膜视神经损害符合慢性青光眼的病理改变.
3. 克隆和筛选出一批与慢性高眼压视网膜损害相关的基因，证明在慢性高眼压下视网膜基因表达平衡失调，推测视网膜损害与此变化有关。
4. 与Ras基因相似率达99%的F9片段广泛存在于慢性高眼压5周后的兔视网膜中，说明该基因片段在慢性高眼压视网膜损害中具有重要的作用，该基因功能有待进一步研究。