目的 探讨外源性人端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase, hTERT）基因能否通过转染人晶状体上皮细胞（HLECs）重建端粒酶活性，进而提高细胞的增殖能力。以及柔红霉素（DNR）对hTERT基因转染后的HLECs生长的抑制作用及有效药物质量浓度。 方法 采用第二代脂质体Effectene Reagent转染技术，将编码hTERT基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT的质粒DNA导入培养的人晶状体上皮细胞，用G418筛选转染成功的抗性克隆并扩大培养。以未转染的人晶状体上皮细胞作对照，对转染后细胞分别用基于PCR ELISA的端粒酶重复扩增协议（Telomeric repeat amplification protocol，TRAP）检测细胞的端粒酶活性；用霍夫曼相差显微技术观察细胞形态学；通过细胞计数法分别比较转染前后的细胞生长曲线和群体倍增水平（population doubling level，PDL）确定基因转染对细胞增殖能力的影响；用流式细胞技术检测细胞DNA倍体含量。用MTT比色法检测柔红霉素对转染后HLECs增殖的抑制作用。 结果 获得一株可传代超过14次达32个群体倍增水平的克隆，超过未转染克隆至少24个群体倍增水平。转染后细胞的阳性克隆可以稳定表达高水平的端粒酶活性，而原代培养的细胞均呈端粒酶阴性。此克隆具有正常的二倍体核型，未出现异倍体。转染后的细胞保持与原代细胞相近的上皮样形态特征。转染后HLECs的生长率高于原代细胞，DNR质量浓度为0.4μg /ml作用1h和0.1μg /ml 作用24h能明显抑制转染后的HLECs的增殖（p＜0.01），1h和24h的50％抑制质量浓度（ID50）分别为2.4μg/ml和0.35μg /ml。 结论 外源性hTERT基因的表达可以重建人晶状体上皮细胞的端粒酶活性，在未发生恶性转化的前提下显著提高了细胞的增殖能力，DNR能有效抑制转染后HLECs的生长。实验为建立非肿瘤病毒基因转染的永生化人晶体上皮细胞系奠定了基础。