目的:研究银杏叶提取物——EGb761对大鼠急性高眼压模型视网膜神经节细胞(RGCs)的保护作用。
方法:SPF级SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,实验周期为28天。1组为阴性对照组,灌胃给0.9%生理盐水;2组为阳性对照组,灌胃给1%灯盏细辛浸膏;3组为用药A组,灌胃给0.25%EGb761;4组为用药B组,灌胃给1%EGb761。所有大鼠于术后2小时及每天按5ml/kg灌药。40只大鼠做急性高眼压模型:右眼为损伤眼,左眼未损伤。将连接输液器的7号头皮针刺入大鼠前房,生理盐水距实验眼的高度是150cm,相当于110mmHg, 维持60分钟。所有大鼠于高眼压后24天采用双侧上丘两点法注射荧光金逆行标记RGC。高眼压后28天过量麻醉处死动物,摘除眼球分离视网膜并将其定向铺片,自然干燥。在荧光显微镜下,用V激发,距视盘中心2mm上下左右各拍摄照片1张,放大倍数125×。利用CPAS软件计数:将上下左右4张照片RGCs数量累加代表单眼RGCs相对密度,RGCs存活率=右眼RGCs相对密度/左眼RGCs相对密度×100%。剔除标准:制作急性高眼压模型时出现眼内出血,眼内炎;RGCs荧光标记不良,部分区域标记不上。统计方法:使用SPSS for Windows 10.0统计软件包,三组以上数据的比较采用单因素方差分析,两组比较用T-test。
结果:1组RGCs存活率(%)=66.15±8.02;2组RGCs存活率(%)=74.97±8.63;3组RGCs存活率(%)=75.86±8.29;4组RGCs存活率(%)=76.85±7.15。1组与2组比较P=0.039;1组与3组比较P=0.027;1组与4组比较P=0.0204;2组与3组比较P=0.832;2组与4组比较P=0.668;3组与4组比较P=0.820。
结论:银杏叶提取物EGb761可有效的保护RGCs,该实验为其应用于临床提供了有力的实验依据。