目的:观察原位人正常角膜基质细胞及培养的人角膜基质细胞对PKCα的表达;探讨PKC抑制剂对人角膜基质细胞增殖的影响。
方法:1、人正常角膜冰冻切片,应用免疫组织化学方法观察PKC亚型α在角膜的原位表达;人角膜基质细胞原代培养,传2-3代,应用免疫细胞化学方法观察PKC亚型α在培养的人角膜基质细胞的表达。2、将不同浓度的PKC的抑制剂加入到培养的人角膜基质细胞中,应用细胞计数法和MTT法观察其对细胞增殖的影响。
结果:1、实验组全部人正常原位角膜基质细胞中未见PKCα的阳性着染。体外培养人角膜基质细胞浆有PKCα的阳性着染。2、MTT法和细胞计数法显示,PKC的抑制剂staurosporine可抑制体外培养的人角膜基质细胞增殖,抑制作用随该浓度增加而增强(F检验,P<0.05),抑制率在9.5%-28.4%。
结论:人角膜基质细胞原位对PKCα无明显表达,特殊的创伤模型-体外培养人角膜基质细胞中PKCα有明显阳性表达;PKC抑制剂可以抑制人角膜基质细胞的增殖。这些结论提示我们PKC在角膜基质细胞增殖过程中扮演了重要角色,抑制PKC的活性有可能成为治疗角膜瘢痕愈合的一个新途径。