目的:LEP503是新近发现的晶状体上皮细胞特有的基因,其与晶状体上皮细胞增殖、分化密切相关。本实验旨在探讨LEP503与后发性白内障的关系,并应用小干扰RNA技术封闭LEP503的表达,从而抑制晶状体上皮细胞的增殖,防治后发性白内障。
方法:将取下的白内障患者的前囊膜一部分进行细胞培养,另一部分放入液氮中冻存。取二到三代培养的细胞与冻存的细胞同时用RT-PCR检测LEP503的表达。利用阳离子脂质体将LEP503的小干扰RNA导入到培养的晶状体上皮细胞中,RT-PCR检测导入小干扰RNA和没导入小干扰RNA的培养的晶状体上皮细胞中LEP503的表达,并用流式细胞仪检测二者的增殖周期。
结果:RT-PCR检测结果显示没经过细胞培养的晶状体前囊膜有LEP503的表达,经过细胞培养的晶状体前囊膜LEP503强表达。导入小干扰RNA的晶状体上皮细胞LEP503的表达比没有导入小干扰RNA的明显减少。流式细胞仪检测结果显示小干扰RNA作用于晶状体上皮细胞后,细胞周期构成比发生明显变化,S期细胞比例减少,G0/G1期细胞比例的显著增加。
结论:在人晶状体上皮细胞增殖、分化阶段LEP503表达明显增加,其与后发性白内障的发生成正相关。应用小干扰RNA能明显抑制LEP503的表达,并使晶状体上皮细胞由增殖状态转入休止状态。本研究可为防治人后发性白内障提供新的途径。