目的 探讨体外培养的人角膜缘上皮干细胞的分子生物学标志及在不同生长环境下的表达水平。 方法 通过对人角膜缘上皮干细胞在传第六代,及在去上皮的羊膜基底膜片上的生长,进入指数生长期时的免疫细胞化学及细胞染色实验,对AE1+AE3、CK19、PCNA、Ki67、MMP-2、MMP-9及碱性磷酸酶(AKP)的表达进行检测,并与原代培养第三天的组织细胞(近似人体内生长环境下的组织细胞)进行比较。结果角膜缘干细胞AE1+AE3的表达量以原代培养第三天最多,细胞是否在羊膜基底膜上生长与表达量无显著关系;CK19、PCNA、Ki67、MMP-2、MMP-9的表达量以原代培养的第三天最多,羊膜上生长的表达量次之;角膜缘干细胞AKP的NBT-BCIP染色(+)。结论 人角膜缘上皮干细胞在体外生长环境下表达AE1+AE3、CK19、PCNA、Ki67、MMP-2、MMP-9,与在体内生长时一致,并表达AKP。在体外培养中,角膜缘上皮干细胞在人去上皮的羊膜基底膜上的生长环境比无羊膜的生长环境更适宜,更接近于自然状态。