目的 为角膜缘上皮干细胞的移植构建近似正常的复层上皮建立实用的体外培养技术。
方法 利用不同细胞粘附力的差异，结合有限稀释法克隆化培养纯化人角膜缘干细胞；用分子生物学标志CK19、AE1＋AE3的免疫学检测方法鉴定干细胞; 不用饲养层细胞,采用非低钙的策略诱导培养复层上皮。
结果 活细胞形态学观察可见细胞层次，HE染色镜下清晰可见深染的柱状基底层细胞及复层鳞状细胞和表层细胞，基底层以上细胞与基底层细胞平行、整齐地排列着。复层上皮石蜡切片CK19阳性细胞的染色深度呈渐变表现。AE1+AE3表达阳性。 结论 不用饲养层细胞支持、非低钙培养富含干细胞的角膜复层上皮的策略是可行的，方法简便。复层上皮的体外成功构建，意味着
今后可以为角膜移植提供更加优越的细胞材料