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|您的位置>>会议投稿查询>>眼底病(投)>>表皮生长因子及其诱发的信号传导通路对人视网膜色素上皮细胞的作用[基础研究] 发送给好友  发表评论,已评论0次   阅读:1019次 关键词:视网膜色素上皮细胞

 
   [作者]: 闫峰 惠延年 王雨生 郭长梅 [单位或文章来源]: 西安市第四军医大学西京医院眼科 710032 [加入时间]:2003/7/24 [稿件录用方式]: 第一会场发言222
  表皮生长因子及其诱发的信号传导通路对人视网膜色素上皮细胞的作用   
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目的:观察表皮生长因子(EGF)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖及移行的影响,探讨EGF-EGFR-MAPK信号传导途径的激活及其作用。方法:培养的人4~6代RPE细胞用于本实验,采用MTT比色法观察不同浓度的EGF(0.1ng⁄ml、 1ng⁄ml、10ng⁄ml、50ng⁄ml、100ng⁄ml)及血清对人RPE细胞增殖的影响;应用RPE损伤模型,计数进入缺损区的细胞,定量观察EGF及血清对RPE细胞移行的影响;用原位杂交及免疫细胞化学的方法,观察EGF刺激及未刺激的RPE细胞上表皮生长因子受体(EGFR)mRNA及蛋白质的表达,同时使用抗磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)1⁄2抗体进行免疫细胞化学染色,观察有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)激活情况。结果 (1)EGF呈浓度依赖性刺激人RPE的增殖;无血清组,10ng⁄ml EGF达到最佳刺激浓度,其增殖率为82%;5%血清组,1ng⁄ml的刺激作用最强达到121%;无血清组与5%血清组间有显著性差异(P<0.01)。(2) 10%血清组中EGF呈浓度依赖性促进RPE移行,1ng⁄ml 时移行能力最强达439%;无血清组EGF促RPE细胞移行能力很弱,各浓度组间及其与对照组间无显著性差异(P>0.05);EGF的促基础RPE细胞移行能力(最强为36%)低于10%血清诱导的RPE细胞的移行能力(强度为147%)。(3)10%血清培养的人RPE细胞EGFR mRNA及蛋白质、MAPK阳性表达,阳性染色主要位于胞浆;1ngml EGF刺激后,EGFR mRNA及蛋白质的表达增强,MAPK阳性表达位于胞核,即EGF对MAPK具有核转位作用。结论 EGF对体外培养的人RPE细胞具有浓度依赖性刺激增殖的作用。但EGF单独作用对人RPE损伤愈合作用不明显,血清可以加强其对损伤愈合作用。EGF可刺激人RPE细胞EGF-EGFR-MAPK信号传导途径,在人RPE细胞增殖激活过程中起重要作用,因此阻断这一途径能抑制RPE细胞增生,为治疗增生性玻璃体视网膜病变(PVR)提供好途径。



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