目的:观察表皮生长因子(EGF)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖及移行的影响,探讨EGF-EGFR-MAPK信号传导途径的激活及其作用。方法:培养的人4~6代RPE细胞用于本实验,采用MTT比色法观察不同浓度的EGF(0.1ng⁄ml、 1ng⁄ml、10ng⁄ml、50ng⁄ml、100ng⁄ml)及血清对人RPE细胞增殖的影响;应用RPE损伤模型,计数进入缺损区的细胞,定量观察EGF及血清对RPE细胞移行的影响;用原位杂交及免疫细胞化学的方法,观察EGF刺激及未刺激的RPE细胞上表皮生长因子受体(EGFR)mRNA及蛋白质的表达,同时使用抗磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)1⁄2抗体进行免疫细胞化学染色,观察有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)激活情况。结果 (1)EGF呈浓度依赖性刺激人RPE的增殖;无血清组,10ng⁄ml EGF达到最佳刺激浓度,其增殖率为82%;5%血清组,1ng⁄ml的刺激作用最强达到121%;无血清组与5%血清组间有显著性差异(P<0.01)。(2) 10%血清组中EGF呈浓度依赖性促进RPE移行,1ng⁄ml 时移行能力最强达439%;无血清组EGF促RPE细胞移行能力很弱,各浓度组间及其与对照组间无显著性差异(P>0.05);EGF的促基础RPE细胞移行能力(最强为36%)低于10%血清诱导的RPE细胞的移行能力(强度为147%)。(3)10%血清培养的人RPE细胞EGFR mRNA及蛋白质、MAPK阳性表达,阳性染色主要位于胞浆;1ngml EGF刺激后,EGFR mRNA及蛋白质的表达增强,MAPK阳性表达位于胞核,即EGF对MAPK具有核转位作用。结论 EGF对体外培养的人RPE细胞具有浓度依赖性刺激增殖的作用。但EGF单独作用对人RPE损伤愈合作用不明显,血清可以加强其对损伤愈合作用。EGF可刺激人RPE细胞EGF-EGFR-MAPK信号传导途径,在人RPE细胞增殖激活过程中起重要作用,因此阻断这一途径能抑制RPE细胞增生,为治疗增生性玻璃体视网膜病变(PVR)提供好途径。