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|您的位置>>会议投稿查询>>青光眼(投)>>体外培养的人眼小梁细胞表达粘附分子CD44[基础研究] 发送给好友  发表评论,已评论0次   阅读:555次 关键词:小梁细胞

 
   [作者]: 李中国 张 虹 [单位或文章来源]: 华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科 430030 [加入时间]:2003/7/9 [稿件录用方式]: 第三会场发言106
  体外培养的人眼小梁细胞表达粘附分子CD44   
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目的 了解体外培养的人眼小梁细胞是否表达粘附分子CD44,探讨粘附分子CD44与原发性开角型青光眼可能的关系。 方法 采用组织块培养法取正常人眼小梁组织体外培养获取小梁细胞,形态学观察结合免疫组织化学检测对小梁细胞进行鉴定;取第3代人眼小梁细胞用Trizol试剂一步法提取小梁细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测粘附分子CD44mRNA在人眼小梁细胞的表达情况;采用免疫印迹(Western-blot)检测小梁细胞CD44蛋白的表达;免疫荧光方法CD44蛋白的表达并对CD44在小梁细胞的表达进行定位;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察脂质体介导的CD44反义寡核苷酸对小梁细胞与透明质酸粘附的影响。 结果 成功获取人眼小梁细胞,形态学观察及免疫组织化学鉴定符合人眼小梁细胞的特点;经RT-PCR扩增得到与设计片段大小一致的单一产物;运用抗人CD44单克隆抗体经Western-blot检测得到分子量约为80kDa的单一蛋白条带,免疫荧光检测显示小梁细胞呈强荧光,主要位于细胞膜;脂质体介导的CD44反义寡核苷酸明显抑制小梁细胞与透明质酸的粘附。 结论 体外培养的人眼小梁细胞表达粘附分子CD44,CD44反义寡核苷酸抑制人眼小梁细胞与透明质酸粘附,CD44分子表达的异常变化可能与原发性开角型青光眼的发病有关。



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