目的:探讨缺氧环境下培养的牛视网膜色素上皮细胞(Retinal pigment epithelium cell RPE)抗凋亡基因bcl-2蛋白表达与牛RPE细胞增殖及血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelium growth factor VEGF)分泌之间的关系,。
方法: 将收获培养的牛RPE细胞,在不同环境(正常:5%CO2,95%空气,37℃;缺氧:3%O2,5%CO2,92%N2,37℃)分别培养24h后:(1)收集上清用 ELISA VEGF kit测定VEGF含量;细胞行抗bcl-2免疫细胞化学染色。(2)分别把缺氧和正常环境培养的细胞上清加到正常环境培养的牛RPE细胞中,培养8h后,用免疫细胞化学染色法观察不同环境下的调理培养液对抗凋亡蛋白bcl-2表达的影响。
结果: 1、缺氧环境培养组VEGF含量和bcl-2表达阳性率分别为171.61±16.02pg/ml、72.6%均高于正常环境培养组( 48.51±24.73pg/ml、38.6%),两组之间均具有显著性差异(p<0.05)。 2、加入缺氧环境培养细胞上清液的细胞A组bcl-2表达阳性率为83.2%,高于加入正常环境培养细胞上清液的细胞B组(21.8%),两组之间具有显著性差异(p<0.05)
结论:1、缺氧促进牛RPE细胞表达bcl-2蛋白
2、缺氧状态下牛RPE细胞VEGF分泌与bcl-2蛋白表达平行升高
3、牛RPE细胞的缺氧调理培养基可以促进体外正常环境培养的牛RPE细胞表达bcl-2蛋白
关键词:缺氧 视网膜色素上皮细胞 增殖 VEGF bcl-2 细胞培养