目的：分离和鉴定早期糖基化晶状体蛋白质。
方法：新鲜完整无损的牛晶状体与〔14C〕－葡萄糖孵育3d和6d，凝胶过滤层析（Sephacry1 S－300HR）分离水溶性蛋白质，采用三氯醋酸沉淀法和放射液闪计数仪监测各组份的放射活度；采用亲和层析（Affi－ge1 601）分离糖基化蛋白质；SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析富含放射性的组份；牛晶状体分别与10mM葡萄糖和10mM果糖孵育，分离糖基化蛋白质；应用Edamn降解法测定氨基酸序列；经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳分离目标蛋白质,胰蛋白酶水解后，反相HPLC分离多肽，并用自动蛋白质测序仪，分析N－末端封闭蛋白质的内部序列，鉴定蛋白质的性质。
结果：放射性标记的糖与晶状体蛋白质的结合程度呈时间依赖性增加，主要是水溶性蛋白质，孵育6d比孵育3d有更多的晶状体蛋白质被糖基化；α－和γ－晶状体蛋白以及分子质量约为36－37kDa的多肽为早期糖基化蛋白质。分离纯化的糖基化蛋白质经Edamn降解法氨基酸序列测定，SDS胶中20kDa的多肽N－末端序列是GKIT，为牛γ－晶状体蛋白，但36kPa多肽的N－末端被封闭；经N－末端封闭蛋白质的内部序列分析，葡萄糖样品中释放出多肽的氨基酸序列片段为：GEYPDYQQ和YELPNYR，经Swiss－Port检索YELPNYR为牛γⅢb－晶状体蛋白质所独有；果糖样品释放出多肽的氨基酸序列片段为：ITFYEDR、RGDYPDYQQW、QULLR和VVDLY，为牛γⅢα－晶状体蛋白，且VVDLY为γIIIα－晶状体蛋白所特有。
结论：γIII－晶状体蛋白是最易被糖基化的晶状体蛋白质。葡萄糖首先攻击的是γIIIb－晶状体蛋白，而果糖则为γIIIα－晶状体蛋白；γIII－晶体蛋白的糖基化可能使蛋白质的结构发生改变，而导致其功能的破坏和蛋白质凝聚，最终形成白内障。深入研究早期糖基化的晶状体蛋白的形成原因和特性，寻找保护该蛋白质糖基化的因素，将可抑制进一步程序化的改变，而达到防治晶状体混浊的目的。