目的:人胚胎视网膜干细胞的体外培养、鉴定和分化研究。
材料和方法:16-20周咪索引产获得的人胚胎视网膜，过400目细胞筛获得单细胞悬液进行体外无血清培养，并进行有血清条件下体外诱导和模拟体内条件诱导的观察，采用免疫荧光法检测视网膜干细胞和视网膜终末细胞抗原的表达，采用RT-PCR方法和实时荧光定量PCR法检测诱导前后细胞NESTIN基因在mRNA水平的表达差异。
结果:从人胚眼视网膜神经感觉层中成功分离出视网膜干细胞，该细胞具有自我复制能力，表达NESTIN；在体外诱导的条件下，可表达视网膜终末细胞标记PKC（双极细胞标记）、GFAP（米勒细胞标记）、Thy1（节细胞标记），且少数细胞表达NESTIN和MAP2，在模拟体内环境诱导后，则不仅表达上述细胞标记，而且Rhodopin（视杆细胞标记）和Syntaxin（无长突细胞标记）表达阳性。实时荧光定量PCR法NESTIN基因表达量诱导后细胞较诱导前细胞明显降低。
结论:人胚胎视网膜神经感觉层中存在具有自我更新能力和多分化潜能的视网膜干细胞。