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|您的位置>>会议投稿查询>>葡萄膜炎及免疫(投)>>EAU中T-bet的表达及其意义的研究[基础研究] 发送给好友　 发表评论,已评论0次 　 阅读:855次　关键词:T-betEAU免疫组化 Th1 / Th2

　
   [作者]: 褚利群 [单位或文章来源]: 广州中山大学中山眼科中心 510060 [加入时间]:2003/8/13 [稿件录用方式]: 书面交流
　 EAU中T-bet的表达及其意义的研究  　
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目的 研究EAU中T-bet的表达及其意义。 方法 取雌性近交系Lewis大鼠28只，其中4只作为正常对照，其余24只大鼠用S抗原免疫制作EAU模型。分别于免疫后7、12、15、21天处死动物，取眼球固定后制作眼组织平片和石蜡连续切片、取脾脏制作石蜡连续切片。组织平片、切片经S-P法免疫组化单染和双染色，光镜观察，细胞计数，统计学分析。抽取房水，用ELISA试剂盒检测房水中IFN-γ、IL-4，IL-12的表达。取脾脏，细胞裂解液提取总蛋白，通过Western杂交检测T-bet蛋白的表达。取脾脏，用Trizol提取总RNA,两步法RT-PCR检测 T-bet DNA的表达 结果 正常对照组眼和脾脏组织中均见少量T-bet阳性细胞，而免疫后7天虹膜、视网膜及脾脏中T-bet的表达增加，免疫后15天达高峰，免疫后21天表达降低，但仍高于正常组。眼和脾脏石蜡切片经免疫组化双染色显示，T-bet阳性细胞多数为CD4阳性。EAU高峰期房水中IFN-γ水平升高，IL-4，IL-12的表达无显著变化。免疫后7天脾脏中T-bet蛋白和T-bet DNA的表达即增加，免疫后15天达高峰。 结论 EAU早期即有T-bet的表达，并伴随EAU整个过程； T-bet的表达在Th1细胞介导的自身免疫性疾病的发生发展中有重要的作用；T-bet的表达从分子生物学水平进一步证明EAU是Th1细胞介导的疾病。


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