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|您的位置>>会议投稿查询>>角膜病(投)>>腺病毒介导酸性成纤维生长因子对兔角膜内皮细胞转染及促增殖作用的实验研究[基础研究] 发送给好友  发表评论,已评论0次   阅读:981次 关键词:基因治疗

 
   [作者]: 柳林 王泳 潘欣 仲明 温新富 戚中田 [单位或文章来源]: 第二军医大学第一附属医院(长海医院)眼科 200433 [加入时间]:2003/3/8 [稿件录用方式]: 第四会场发言114
  腺病毒介导酸性成纤维生长因子对兔角膜内皮细胞转染及促增殖作用的实验研究   
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目的 观察复制缺陷型重组腺病毒载体介导酸性成纤维生长因子( acidic fibroblast growth factor aFGF)对体外培养的兔角膜内皮细胞的转染效率及促增殖作用。方法 :293A细胞扩增复制缺陷型重组腺病毒,选用TCID50 法测定病毒滴度。体外培养兔角膜内皮细胞(Rabbit corneal endothelial cell RCEC),用携带报告基因(LacZ)的重组腺病毒(Ad-LacZ)转染RCEC,X-gal染色估计瞬时转染效率,将含aFGF的重组腺病毒(Ad-aFGF)转染RCEC,采用RT-PCR 、酶免疫细胞化学分别检测aFGF转录及表达情况,噻唑盐(MTT)法检测转基因细胞增殖情况。结果 病毒滴度为2×108pfu/ml;重组腺病毒转染RCEC 24h后即可检测到外源基因表达,当感染倍数(multiplicity of infection,MOI)值等于20时,Ad-LacZ对RCEC的转染效率为100%,转染Ad-aFGF对RCEC增殖有促进作用(F=217.107,P<0.05)。结论 复制缺陷型重组腺病毒载体介导的外源基因在RCEC中可有效表达, 转染Ad-aFGF对RCEC增殖具有促进作用。



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