目的:探讨前房相关免疫偏离(anterior chamber associated immune deviation,ACAID)形成前后对内毒素诱发的葡萄膜炎(endotoxic-induced uveitis,EIU)的影响。
方法:将5μl光感受器间维生素A类结合蛋白(interphotoreceptor retinoid binding protein,IRBP)(10μG/μl)注射到Spar-Dawley(SD)大鼠前房诱导ACAID的动物模型,于前房注射IRBP后3d(3d组)、7d(7d组)行足底注射200μg伤寒杆菌内毒素(Salmonella Typhimurium Lipoplysaccharide, LPS)。同时进行迟发性超敏反应(delayed type hypersensitivity,DIH)的检测和酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测血清白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)水平,以监测ACAID的形成,并取脾组织行逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和western免疫印迹,检测GATA-3基因及蛋白表达的变化,进行半定量分析。LPS注射后24h观察EIU的临床表现,并摘取眼球行组织学检查。LPS单纯注射组作对照组。
结果:对照组和3d组DTH呈阳性反应,血清中未测出IL-4,GATA-3基因和蛋白表达无增加;7d组DTH呈阴性反应,血清中IL-4升高(9.96±2.45pg/ml,P<0.01),GATA-3基因和蛋白表达升高。临床组织学检查均可发现,对照组和3d组于LPS注射后24h眼部炎症达高峰,瞳孔中央完全被纤维素样渗出膜遮盖,7d组大鼠眼部出血、渗出明显减轻;组织学检查发现7d组较对照组和3d组虹膜及睫状体表面、基质内和玻璃体内细胞渗出明显减少。
结论:前房注射抗原后3d,GATA-3及IL-4的表达无增加,ACAID未能形成,对LPS诱发眼部炎症无预防作用;前房注射抗原7d后,GATA-3及IL-4的表达已增加,ACAID形成,此时可减轻LPS诱发的葡萄膜炎。