目的 研究羊膜负载小鼠胚胎干细胞（embryonic stem cell，ESC）用于眼表重建的可能性，为严重眼表疾病的治疗提供新的途径。
方法 将绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP）质粒转染小鼠ES-D3细胞株，使之成为能稳定表达GFP基因的小鼠ES-GFP细胞。将小鼠ES-GFP细胞接种到保存人羊膜上共培养4天，用5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）标记后移植到新西兰兔眼表结膜缺损区，分别于移植后1，2，3，4，6和8周，摘取各组实验眼行荧光显微镜、组织病理学和免疫组织化学检查，荧光检测ES-GFP细胞在组织中的荧光表达，组织病理学检查移植到眼表的ES-GFP细胞的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况；免疫组织化学检测移植到眼表的带有BrdU标记的ES-GFP细胞CK3/CK12和CK13的表达。
结果 小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜后能在羊膜上贴附生长，与羊膜共培养4天后ES-GFP细胞部分分化为多角形细胞，采用羊膜负载ES-GFP细胞移植到兔结膜缺损区, 术后组织学检查羊膜植片在术后2周溶解,术后4周结膜缺损区已愈合,荧光显微镜可在结膜上皮层检测到绿色荧光带, 免疫组织化学检测结膜上皮层CK13表达阳性，CK3/CK12表达阴性，在重建的结膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞，光镜及电镜检查未见瘤性增殖。
结论 采用人羊膜负载小鼠胚胎干细胞进行结膜重建, 小鼠胚胎干细胞能在兔结膜基质存活并分化为结膜上皮样细胞，可望为眼表疾病的治疗提供一种新的途径。