目的 探讨微型角膜刀联合纤维蛋白粘合剂行无缝线光学板层角膜移植术的可行性和安全性。方法24只兔均分为两组，用微型角膜刀制作植片和植床，DTAF对植片和植床损伤的胶原纤维染色，一组应用市售纤维蛋白生物粘合剂Tisseel，一组不使用Tisseel，将异体植片固定在植床。术后3天，2周，1月，3月裂隙灯显微镜观察角膜透明度，排斥反应情况，共焦显微镜活体观察术后角膜的创伤愈合反应。同期随机处死兔子，取角膜标本进行常规HE观察，并用荧光显微镜观察层间新生胶原纤维的情况。结果 Tisseel 组91.67%(11/12眼)的植片在位，不使用Tisseel组1 (1/12眼)植片在位，Tisseel 组术后1月角膜完全透明，不使用Tisseel组7眼haze在1级以上；共焦显微镜发现Tisseel组术后植片植床层间附近的基质细胞数量减少，而后基质细胞、内皮细胞数量和形态均无变化。HE染色，Tisseel 组术后3天层间出现无固定形态的嗜曙红染色带，1月时消失， DTAF组织染色的荧光显微镜未见术后明显的新生胶原纤维；不使用Tisseel 组HE染色和DTAF组织染色的荧光显微镜均可见明显的新生胶原纤维。结论 微型角膜刀联合纤维蛋白粘合剂行无缝线光学板层角膜移植术手术简便，安全；术后角膜的创伤愈合反应轻微，纤维蛋白粘合剂不影响角膜的光学性能。