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|您的位置>>会议投稿查询>>角膜病(投)>>单纯疱疹性角膜炎中基质蛋白酶的表达[基础研究] 发送给好友  发表评论,已评论0次   阅读:786次 关键词:蛋白酶

 
   [作者]: 曹婷 邢怡桥 杨燕宁 [单位或文章来源]: 武汉大学人民医院眼科 430060 [加入时间]:2003/8/18 [稿件录用方式]: 书面交流
  单纯疱疹性角膜炎中基质蛋白酶的表达   
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目的:我们对小鼠HSK模型中MMP-2,MMP-9的mRNA表达进行检测,探讨其在HSK病程中的变化及作用。
方法: 1 动物:BALA/C小鼠25只,雌性,6-8周,分为5组每组5只
2 方法:手术显微镜下十字交叉搔刮右眼角膜上皮后点滴5μlHSV-1于角膜上皮,滞留10秒。第一组5只小鼠为正常组不行此操作。于感染后2,7,14,28天处死动物取出角膜,-70℃储存备用。
3 RT-PCR检测:采用TRIZOL一步法试剂盒抽提总RNA。采用MMLV逆转录酶,Rnasesin,dNTPmix逆转录RNA成cDNA。采用TaqDNA,dNTP及引物进行PCR。产物行凝胶电泳紫外光观察,成像分析系统测定光密度值。
4 统计学处理:采用方差分析Dunnett-t检验法比较正常组与实验组的MMP-2,MMP-9光密度值。以P<0.05作为差异有显著意义标准。
结果:1 MMP-2:正常角膜未见明显电泳条带,第2天表达上升,第7天稍有下降,第14天明显增强第28天表达最强。感染0,2,7,14,28天吸光度值分别为0.66+0.31,1.02+0.11,0.91+0.69,1.28+0.20。P<0.05。
2 MMP-9:正常角膜见微弱电泳条带,第2,7,14,28天条带变化趋势同MMP-2。吸光度值分别为0.86+0.31,1.27+0.48,1.15+0.34,1.63+0.14,2.29+0.85。P<0.05。
结论:本研究显示HSV-1感染小鼠角膜后MMP-2,MMP-9的mRNA表达均较正常组织高且随着病程的发展大体上表现出增强的趋势。MMPs过度表达可导致溃疡发展及新生血管形成。因此推测抑制MMPs的表达可抑制角膜溃疡的发展及促进愈合。



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