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应用变性高效液相色谱法快速筛查TGFBI基因单核苷酸多态性位点         
应用变性高效液相色谱法快速筛查TGFBI基因单核苷酸多态性位点
作者:王琪1 陈… 文章来源:山东省立医院集团眼耳鼻喉医院, 250021 点击数:1691 更新时间:2005/6/30 17:01:26
目的 探讨应用变性高效液相色谱技术( Denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC)快速筛查TGFBI基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNP)位点的可行性。 方法 取50个正常人外周血10ml,提取基因组DNA,聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)分别扩增TGFBI基因的17个外显子,应用DHPLC技术对17个外显子同时进行筛查,对发现有异常DHPLC波峰的样本相应外显子进行双向测序,并与正常基因序列比对,寻找SNP位点。 结果 在正常人TGFBI基因中发现了数种SNP位点。其中V 627 D位点突变及G 264 W、 R 555 W双位点突变、N 272 N (816 C>T)及L601L (1803 G>A)单核苷酸多态性为首次发现。 结论 DHPLC技术具有高通量、经济、操作自动化等特点,为较理想的突变筛查工具,可用于角膜营养不良TGFBI基因突变的筛查
会议投稿录入:aya610    责任编辑:毛进 
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