| 目的 探讨和研究单眼斜视及剥夺性弱视猫外侧膝状体病眼相应输入层神经元的生长相关蛋白43信使核糖核酸（Growth Association Protein43 mRNA, GAP43mRNA）的表达变化规律及其意义。为临床防治斜视性和剥夺性弱视提供参考依据并进一步认识弱视形成机制和寻找拮抗弱视形成及逆转弱视更行之有效的方法。方法 随机将36只出生2~3wK健康幼猫分为3组：正常发育（Normal Develop.，ND）组12只；单眼斜视(Monocular Strabismus, MS)组动物12只，手术眼别为右眼6只, 左眼6只, 术后内斜15-350不等。单眼剥夺(Monocular Deprived, MD)组动物行手术封闭实验眼，右眼6只, 左眼6只，共计12只。幼猫的饲养条件为正常发育ND、MS和MD组全部实验猫在同等自然视环境中散放喂养, 从每只动物手术后第一天算起到第16周时行视觉电生理(MPVEPs)检测。以6导程图形视觉诱发电位仪（6-channel- pattern visual evoked potential, 6CPVEP）检测MS和MD弱视的形成后，灌注固定实验猫并快速取材。动物麻醉后放出心血管系统血液, 快速冲洗心血管系统, 接快灌注含有0.5%DEPC的4℃冷固定液(4%多聚甲醛磷酸缓冲液, PH7.2), 再慢灌注1000ml含有0.5%DEPC的4%多聚甲醛, 0.5%戊二醛和0.2%苦味酸的4℃磷酸缓冲溶液(PH7.2)2小时。冠状切取同侧和对侧外侧膝状体组织块，在4℃冰箱放置过夜后, 标本块转至15%蔗糖溶液(PBS PH7.2)中浸泡12小时,待标本块下沉后行冰冻切片或振动切片。幼猫外侧膝状体组织切片经原位杂交程序和免疫细胞化学呈色后每组选取4张，在QTM970型图像分析仪的10×40倍光镜下, 测量外侧膝状体实验眼输入层的GAP-43mRNA表达阳性信号积分光密度/单位面积，并与同组相应组织切片Nissl染色常规阴性对照和GAP43免疫细胞化学阳性结果比较。统计学分析处理：所有数据应用SAS6.04版PC统计软件包进行T-test检验处理。 结果 各组实验猫外侧膝状体实验眼相应输入层的组织切片经原位杂交组织化学和免疫细胞化学SABC技术处理后，在高倍光学显微镜下，GAP-43基因在外侧膝状体的实验眼相应输入层的表达产物GAP-43mRNA有其特征。在正常ND组外侧膝状体实验眼相应输入层的GAP-43mRNA原位杂交阳性信号呈紫蓝或紫红色，细胞核空染，具有突触形态学特点。GAP-43免疫阳性神经元层棕褐色，其胞体形态不明显，可见GAP-43阳性物质呈点片状重叠散布在免疫阳性神经元胞体近端和远端，符合GAP-43蛋白的表达特性。在MS和MD组的外侧膝状体实验眼相应输入层，GAP-43mRNA原位杂交阳性信号和GAP-43免疫阳性神经元及免疫阳性物质明显减少，表达减弱。以ND组外侧膝状体实验眼相应输入层与MS组外侧膝状体实验眼相应输入层及MD组的外侧膝状体实验眼相应输入层比较GAP-43mRNA原位杂交阳性信号和GAP-43免疫阳性神经元的积分光密度和数密度, 两者都具有显著差异性(P<0.001, P<0.01)；典型表现为MS和MD的外侧膝状体实验眼相应输入层GAP-43mRNA原位杂交阳性信号及GAP-43免疫阳性神经元的积分光密度减弱和数密度的减少。而ND组外侧膝状体实验眼相应输入层则出现了GAP-43mRNA阳性信号的高表达和GAP-43免疫阳性蛋白表达的增高。结论 ①GAP-43是神经元轴突末端生长锥内的一种轴突转运蛋白。在中枢神经系统神经元生长发育和延伸它们的轴突时，GAP-43出现高表达现象。GAP-43在脑的某些区域的持续性表达对脑的长时程增强（Long-Term Potentiation, LTP）的维持、学习记忆和双眼竞争突触位点机制的形成起着重要的作用。本实验各组猫外侧膝状体实验眼相应输入层组织切片的原位杂交组织化学和免疫细胞化学结果证实了GAP43的这一分子神经生物学特性。②ND组实验眼相应输入层神经元轴突突触内生长锥GAP-43mRNA的持续高表达以视觉神经系统神经元正常发育轴突持续性的电活动为基础，而持续性的电活动的维持需要NTFs神经营养因子介入，且具有目标倾向性和活性依赖性。GAP-43mRNA 在外侧膝状体ND眼相应输入层的持续高表达可以稳定突触连接及保持生长发育期的LTP和整体MPVEP电生理活性存在。③MS组外侧膝状体实验眼相应输入层及MD组的外侧膝状体实验眼相应输入层神经元GAP-43mRNA不同程度的低表达与ND组外侧膝状体实验眼相应输入层出现了GAP-43mRNA阳性信号的高表达和GAP-43免疫阳性蛋白表达的增高现象形成了鲜明对比，此说明视环境的紊乱和形觉剥夺对视觉神经系统神经轴树突触树枝的生长发育起着至关重要的作用。
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