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| MAPK通路在角膜创伤愈合中的调节 |
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作者：吴欣怡 杨… 文章来源：山东大学齐鲁医院眼科 250012 济南，山东 点击数：1458 更新时间：2005/6/29 14:06:16 
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| 目的： 研究MAPK通路在角膜基质合成中的的调节作用；探讨基因水平调控角膜创伤愈合的靶点。方法：兔眼角膜纤维细胞培养并传代。分为1个空白对照组组（5%FBS）、2个对照组（单纯TGF或CTGF）和6个实验组：PD+T（PD98059+TGF）、SB+T（SB203580+TGF）、SP+T（SP 600125+TGF）及PD+C（PD98059+CTGF）、SB+C（SB203580+CTGF）、SP+C（SP600125+CTGF）。加入MAPK通路的特异性阻断剂PD98059、SB203580、SP600125预处理30分钟后加TGF2ng/ml或CTGF50ng/m l4小时，收集细胞。RT-PCR检测CTGFmRNA及FNmRNA的表达，Western-Blotting检测Ι型胶原的表达。
结果：1) RT-PCR结果：①TGF、CTGF明显上调CTGF、FN的表达；SB203580抑制TGF诱导的FN表达；PD98059抑制TGF诱导的CTGF的表达；SP600125抑制TGF诱导的CTGF、FN的表达及CTGF诱导的CTGF、FN的表达。②CTGF mRNA的表达：加TGF后，FBS组CTGFmRNA的表达与各实验组相比均有显著差异；TGF组与PD+T组及SP+T组差异显著，与SB+T组无明显差异；SB+T组与PD+T组及SP+T组差异显著；PD+T组与P+T组无明显差异。加CTGF后，FBS组CTGFmRNA的表达与各实验组相比均有显著差异；CTGF组与SB+C组及PD+C组无显著差异，而与SP+T组差异显著；SB+C组与 PD+C组无显著差异。③FNmRNA的表达：加TGF后，FBS组FNmRNA的表达与各实验组相比均有显著差异；TGF组与SB+T组及SP+T组差异显著，而与PD+T组无显著性差异；SB+T组与PD+T组差异有显著性而与SP+T组无显著性差异；PD+T组与P+T组有显著性差异。加CTGF后，FBS组FNmRNA的表达与CTGF组及SP+C组差异显著，而与SB+C、PD+C组差异无显著性；CTGF组与SB+C、PD+C组差异无显著性，而与SP+C组有显著差异；SB+C组与PD+C组无显著差异，与SP+C组有显著差异；PD+C组与SP+C组有显著差异。2) Western Blotting：TGF明显上调Ι型胶原蛋白；SP600125有效抑制TGF诱导产生Ι型胶原蛋白；PD98059、SB203580的作用不明显。
结论：TGF、CTGF可明显上调CTGF、FN的表达。TGF上调CTGF与ERK及JNK通路有关；TGF调节FN与P38及JNK通路有关； CTGF调节自身及FN均与JNK通路有关。TGF诱导产生Ι型胶原主要与JNK通路有关。由此推论有效阻断JNK通路可以减少TGF诱导的CTGF的表达、CTGF的自身上调作用及胶原组织形成的量，有望成为调控角膜创伤后的瘢痕形成的靶点。
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| 会议投稿录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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