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人骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞转化的初步研究         
人骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞转化的初步研究
作者:洪晶  顾… 文章来源:中国医科大学附属一院眼科 点击数:1059 更新时间:2005/6/28 11:40:15
【摘 要】目的 研究人骨髓间质干细胞(hMSCs)在体外与损伤的人角膜缘干细胞(hLSCs)共培养时的转化情况。方法 体外分离培养hMSCs和hLSCs,用CD34、CD44免疫细胞化学法和流式细胞术对hMSCs进行鉴定;角蛋白3/12(3/12)、角蛋白19(K19)免疫细胞化学法对hLSCs进行鉴定。采用逆转录病毒载体介导法,增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)基因为标记基因,转染培养的hMSCs。将近融合的hLSCs,经47℃高温处理造成热损伤体外模型,再加入带有荧光标记的hMSCs共同培养,荧光显微镜下观察。用角蛋白19(K19)免疫细胞化学法检测共同培养的细胞。结果 HMSCs呈克隆样生长,CD34表达阴性、CD44表达阳性,流式细胞术结果显示hMSCs CD44阳率为92.59%,CD34阳性率为0.01%。HLSCs免疫细胞化学结果显示角蛋白19(K19)表达阳性,角蛋白3/12(K3/12)表达阴性。荧光显微镜下观察EGFP转染成功的hMSCs呈现强绿色荧光。HLSCs经高温损伤后,大多数细胞的细胞间连接消失。共同培养后hMSCs部分细胞表达角蛋白19(K19),并有多核细胞现象。结论 在损伤的微环境下,hMSCs可以向hLSCs转化。在此过程中存在细胞融合现象,细胞融合可能是组织损伤修复的一种方式。 【关键词】 人骨髓间质干细胞 人角膜缘干细胞 共同培养 细胞融合 转化
会议投稿录入:hongjing    责任编辑:毛进 
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