| 目的:探讨用流式细胞技术测定I型单纯疱疹病毒药物敏感性的可行性。
方法:将对无环鸟苷（ACV）敏感的HSV-1病毒株（SM44）和对ACV耐药的HSV-1病毒株（ACVr）接种于非洲绿猴肾细胞，在培养皿中加入抗病毒药物ACV、更昔洛韦（GCV）、膦甲酸(PFA)、阿糖腺苷(Ara-A),浓度分别为0、10－5、10－6、10－7及10－8 mol/L，培养箱培养18小时后标记了异硫氰酸荧光素的鼠抗HSV-1糖基化蛋白C单克隆抗体,作用30分钟进行流式细胞仪检测，记录每种抗病毒药物各浓度下表达HSV-1糖基化蛋白C的百分比（荧光强度(102）。根据结果进行回归分析，然后根据回归方程计算出IC50值。对照组采用经典的空斑减数试验检测同上两株病毒对4种抗病毒药物的敏感性。
结果:实验组中SM44和ACVr对无环鸟苷的检测结果(μmol/L)为0.42±0.16和67±11.14，两者之间差异有显著性（P <0.05）；对更昔洛韦的检测结果(μmol/L)为0.53±0.06和61.00±12.77，两者之间差异有显著性（P <0.05）；对膦甲酸的的检测结果(μmol/L)为60.33±17.00和71.33±9.70，两者之间差异无显著性（P >0.05）;对阿糖腺苷的检测结果(μmol/L)为1.34±0.23和1.61±0.22，两者之间差异无显著性（P >0.05）。对照组中两病毒株对无环鸟苷的的检测结果(μmol/L)为0.24±0.04和43.00±4.60，两者之间差异有显著性（P<0.05）; 对更昔洛韦的检测结果(μmol/L)为0.41±0.04和32.00±3.00，两者之间差异有显著性（P<0.05）; 对膦甲酸的检测结果(μmol/L)为28.67±2.10和31.70±2.50，两者之间差异无显著性（P >0.05）；对阿糖腺苷的检测结果(μmol/L)为1.02±0.03和1.03±0.08，两者之间差异无显著性（P >0.05）。实验组和对照组的结果之间为正相关关系（r=0.9774, P<0.001）。
结论: 流式细胞技术检测方法得出的结果与PRA一致，且具有快速、定量、客观、易操作的特点，可用于测定I型单纯疱疹病毒的药物敏感性。 |
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