目的:本实验的目的旨在观察钙通道阻滞剂(calcium channel blockers,CCB)硝苯地平(nifedipine,Nif)对大鼠晶状体上皮细胞(rat lens epithelial cells,RLECs)增殖及细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)合成的影响,为药物治疗后发障提供理论基础和实验依据。
方法:取30只SD新生鼠(5-8天鼠龄)晶状体行消化法和组织块法原代培养,用传代的2-3代RLECs在96孔板中培养24h,分别加入不同浓度的Nif,培养24h,48h,72h后应用四甲基偶氮唑盐3-(4,5-dimethy1-thiazo1-2-yL)-2,5-dipheny1 tetrazolium bromide,MTT)显色法观察Nif对大鼠晶状体上皮细胞增殖的影响;用传代的2-3代RLECs在24孔板中培养24h,加入不同浓度的Nif,培养24h,48h,72h后应用免疫组织化学SP法检测Nif对细胞外基质(ECM):层粘连蛋白(Laminin)表达的影响。
结果:1:随着Nif浓度的增加,大鼠晶状体上皮细胞增值率均分别减少,以72小时为明显。其中在48小时与24小时之间没有显著性差异,但72小时与24小时之间有显著性差异。
2:随着Nif浓度的增加,大鼠晶状体上皮细胞层粘连蛋白表达减少,且药物在48小时,72小时均与24小时之间有显著性差异。
结论:本研究通过MTT法证实了Nif对RLECs有增殖抑制作用,并随浓度及时间增加而增强;对大鼠晶状体上皮细胞合成层粘连蛋白(Laminin)有抑制作用。
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