| [摘要] 目的 探讨以羊膜基底膜为载体培养角膜内皮细胞移植的可能性,为培养内皮细胞移植治疗角膜内皮失代偿疾病提供依据及方法。 方法 体外培养扩增兔角膜内皮细胞，采用亲脂性碳花青染料CM-Dil对细胞进行标记，然后种植于去除上皮细胞的羊膜基底膜上,通过体外培养形成单层角膜内皮层,并进行形态学、组织学、超微结构及细胞标记情况的观察；将羊膜为载体体外培养的角膜内皮层对切除后板层的兔角膜进行移植，同时以无培养内皮细胞的羊膜移植及单纯角膜后板层切除为实验对照，术后观察角膜透明度及厚度，对其进行组织学及细胞标记情况的检测。 结果 5-7天角膜内皮细胞即在羊膜基底膜上融合生长成单层,细胞为扁平多角形细胞，排列紧密，细胞密度大于3000个/mm2,其形态及结构与生理状态下的角膜内皮组织相似，荧光显微镜下可见内皮细胞被CM-Dil标记后显现红色荧光；培养内皮层移植后角膜维持相对的透明及薄度，而无内皮细胞羊膜移植及及单纯后板层切除两组对照角膜严重水肿、混浊，厚度超过实验组角膜，有显著性差异，培养内皮移植后角膜形成新的内皮层，通过标记的细胞发现移植后细胞仍为培养移植的内皮细胞而非周边细胞的移行。 结论 羊膜基底膜是角膜内皮细胞生长和移植的良好载体，体外培养角膜内皮细胞移植有望代替供体角膜移植，具有广阔的应用前景。 |
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