目的 研究建立慢性高眼压模型的方法,观察在高眼压状态下大鼠眼压,视网膜,视神经细胞结构的变化及其视神经纤维丢失的关系,为青光眼视功能损害的机制研究提供实验基础。
方法 构建SD大鼠慢性高眼压模型,动物麻醉后分离巩膜上静脉后烧灼并剪断静脉回流侧残端,并烧灼大部分角巩膜缘血管。右眼为对照眼,左眼为正常对照眼。于术后3天、7天、4周用tono-pen眼压计监测动物麻醉状态下的眼压。在术后2周、4周的大鼠进行荧光金逆行标记视神经节细胞,3天后处死动物,全视网膜铺片后使用荧光显微镜比较视网膜节细胞数目。另同时于术后2周、4周处死动物并摘除双侧眼球和视神经,分别冰冻切片和石蜡切片,进行甲苯胺蓝染色,光镜下观察比较不同时间段视网膜视神经节细胞计数和视神经髓鞘密度变化。
结果 大鼠高眼压模型建立后,眼压术后3天平均值为28.50±3.50mmHg,术后7天平均值为34.80±4.40 mmHg,术后4周平均值为20.67±2.49 mmHg,对照眼平均值为13.67±1.49 mmHg。经荧光金逆行标记的大鼠视网膜节细胞数目在4周时有明显的减少。视网膜切片甲苯胺蓝染色也可见视网膜节细胞数目也有明显的减少。在4周时高眼压眼视神经甲苯胺蓝染色显示髓鞘密度可见明显降低。
结论 使用烧灼巩膜上静脉及角膜缘周边血管能成功升高眼内压,并保持持续高眼压状态。荧光金显示视网膜神经节细胞数目显著减少,视神经髓鞘密度也显著减少。持续眼压升高对大鼠视网膜神经节细胞及视神经有明显的损伤作用。 |