目的 探讨组织工程角膜重组人Ⅲ型胶原(RHC-Ⅲ)/聚[3-(甲基丙烯酰胺)丙基-二甲基(3-磺丙)胺](PMPDSAH)互穿聚合物网络(IPN)(RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN)水凝胶植入兔眼的生物相容性及其作为角膜替代物的可行性。
方法108只中国大耳白兔随机分为2组,实验组90只,正常对照组3只,剩余15只(30眼)为C组提供供体角膜。实验组根据植入材料不同分为RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组(A组,30只)、负载神经生长因子(NGF)的RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN组(B组,30只)和同种异体角膜组(C组,30只),右眼为手术眼。将3种材料分别植入兔角膜前板层,术后观察有无排斥反应,记录角膜透明度、新生血管(CNV)评分和上皮化时间,术后3天、1周、2周、1个月、3个月和6个月取兔角膜行苏木素-伊红(HE)染色,术后6个月行角膜上皮细胞特异性标志蛋白K3抗体AE5的免疫组织化学检测。对实验组间角膜透明度、新生血管评分和角膜上皮化时间进行比较。
结果 观察期间,术后无明显排斥反应。术后6个月,实验各组角膜透明度和新生血管评分与正常对照组比较差异无统计学意义( 2=4.34,P=0.23; 2=2.60,P =0.46),3组上皮化时间比较差异有统计学意义(tA-B=11.97,P =0.00;tC-B=5.80,P =0.00;tA-C=6.32,P =0.00)。HE染色见A、B组材料能与兔角膜融合,使上皮长入,术后6个月新生胶原纤维排列基本规则,免疫组化显示角膜上皮细胞特异性标志蛋白K3抗体AE5表达阳性。
结论 RHC-Ⅲ/PMPDSAH IPN与兔眼的生物相容性较好,NGF可以有效促进角膜创口愈合和上皮再生,提高其力学强度后,有望作为一种安全有效的角膜替代物。 |