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小梁细胞体外培养实验的研究         
小梁细胞体外培养实验的研究
作者:彭清华 文章来源:长沙市韶山中路113号湖南中医药大学 点击数:1180 更新时间:2008/1/20
目的:观察外培养的人眼小梁细胞体的形态。
方法:人眼小梁组织的眼球来源于突然死亡、无眼病史者,年龄20~35岁,死亡48小时以内。将小梁组织块剪成约2mm×1mm×1mm大小,移入25ml的培养瓶中进行培养,每日以光镜观察。当小梁组织块周围细胞生长达到局部融合后,按1:1或者1:2传代培养。取培养在25ml培养瓶中接近融合的传3代人眼小梁细胞行透射电镜观察细胞超微结构。
结果:光镜观察:小梁组织块接种后于7~12天开始细胞游离出组织块,开始部分细胞收缩成团,部分细胞成条索状或不规则梭型,体外培养的人眼小梁细胞形态介于上皮细胞和内皮细胞之间,呈现混合状态。原代细胞形态不一,呈梭型、不规则三角形,常含少许色素颗粒,生长缓慢,一般需7-10d才能融合;传代细胞3~5代多无色素颗粒,多在传代后 48h 生长速度显著增加,72h 后开始有细胞融合。透射电镜观察:细胞体多呈圆形或椭圆形,表面微绒毛多见;细胞之间的连接主要为缝隙连接;胞质内多见次级溶酶体,其中有多个髓鞘样结构,粗面内质网丰实,线粒体较多,偶见高尔基体,含有大量的糖原颗粒;胞核不规则,边缘常见凹陷,核膜清晰,核内染色质呈细颗粒状均匀分布,密度较低。
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