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米诺环素对体外培养视网膜神经细胞的抗凋亡作用         
米诺环素对体外培养视网膜神经细胞的抗凋亡作用
作者:高艺 唐仕… 文章来源:广州 中山大学中山眼科中心,先烈南路54号 510060 点击数:3214 更新时间:2007/6/22 9:32:45
目的:观察米诺环素对谷氨酸诱导的视网膜神经细胞凋亡的抑制效果,分析其作用机制。 方法:原代培养视网膜神经细胞,分为正常对照组、米诺环素对照组(米诺环素20μM)、谷氨酸对照组(谷氨酸1mM)和米诺环素治疗组(米诺环素20μM+谷氨酸1mM)。干预1小时后行Annexin V/PI流式细胞仪检测,计数凋亡细胞数量;流式细胞仪检测Rh123,评估线粒体膜电位改变。干预12小时后行MTT检测细胞活性;取细胞培养上清做一氧化氮合酶(NOS)的活力单位检测。 结果:干预1小时后,Annexin V/PI流式细胞仪检测凋亡细胞比例:正常对照组,5.1%;米诺环素对照组,4.3%;谷氨酸对照组,15.2%;米诺环素治疗组,8.3%。流式细胞仪检测Rh123,得出各组阳性率:正常对照组,67.1%;米诺环素对照组,54.2%;谷氨酸对照组,27.5%;米诺环素治疗组,32.4%。干预12小时后,MTT检测各组细胞吸光度均值:正常对照组,0.093±0.008;米诺环素对照组,0.099±0.012;谷氨酸对照组,0.0378±0.008;谷氨酸+米诺环素治疗组,0.08775±0.016。经统计,治疗组与正常组之间无显著性差异,谷氨酸对照组与其他各组之间均有显著性差异。NOS活力单位检测,以其他各组与正常组的比值进行统计,均数为:正常对照组,1;米诺环素对照组,0.987±0.219;谷氨酸对照组,1.513±0.472;米诺环素治疗组,1.176±0.259。其中谷氨酸对照组与其他三组之间有显著性差异。 结论:20μM米诺环素可显著减轻谷氨酸诱导的视网膜神经细胞凋亡,其作用机制与稳定线粒体膜电位,以及抑制NOS活性有关。
会议投稿录入:aya610    责任编辑:毛进 
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