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| 蛋白酶体β5亚单位(PSMB5)基因过表达对蛋白酶体活性及晶状体上皮细胞的影响 |
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作者：张铁英，… 文章来源：广州 中山大学中山眼科中心，先烈南路54号 510060 点击数：2971 更新时间：2007/6/22 9:26:19 
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| 目的】探讨蛋白酶体β5亚单位(PSMB5)基因过表达对蛋白酶体活性的影响及其在氧化环境下对晶状体上皮细胞的调节作用。【方法】构建重组质粒pcDNA3.1-PSMB5并将其转染入人晶状体上皮细胞株SRA01/04中，建立稳定表达细胞系，同时设pcDNA3.1空载体为对照组。western blot法检测蛋白酶体β5、β1、β2以及α6蛋白的表达情况；用特异性荧光底物检测蛋白酶体胰蛋白酶样（C-T）、肽谷氨酰胺－肽水解样（PGPH）样酶活性，H2O2分别作用PSMB5转染细胞及空载体转染细胞后，检测细胞内氧化蛋白含量的改变。【结果】转染后用G418筛选3周后，获得PSMB5转染及空载体转染的G418抗性的细胞克隆。PSMB5转染细胞的β5、β1、β2亚单位蛋白表达强度明显增高于空载体转染细胞，而α6亚单位蛋白表达无显著性差异。低浓度H2O2作用后， PSMB转染细胞和空载体转染细胞内氧化蛋白含量均增加，但PSMB转染细胞内氧化蛋白含量明显低于空载体转染细胞，差异具有统计学意义（P＜0.05）。【结论】人晶状体上皮细胞内蛋白酶体β5亚单位过表达能上调蛋白酶体的活性，减少细胞内氧化蛋白蓄积，提高细胞生存能力，发挥重要的保护作用。
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| 会议投稿录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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