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| CTLA4-FasL双功能蛋白抑制小鼠角膜移植免疫排斥反应的实验研究 |
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作者：陈敏 史伟… 文章来源：山东省眼科研究所 266071 点击数：989 更新时间：2006/7/7 10:55:07 
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| 目的 探讨基因技术合成的CTLA4-FasL双功能融合蛋白预防小鼠角膜移植术后免疫排斥反应发生的疗效并对其机理进行研究。
方法 建立小鼠穿透性角膜移植动物模型，供体为C57BL/6小鼠，受体为BALB/c小鼠，施行右眼穿透性角膜移植，随机分为5组。A组 对照组（单纯行角膜移植，不经任何治疗）（10只），B组 0.1ug/mL CTLA4-FasL蛋白浸泡角膜植片组（10只），C组 1ug/mL CTLA4-FasL蛋白浸泡角膜植片组（10只），D组 10ug/mL CTLA4-FasL蛋白浸泡角膜植片组（10只），E组 20ug/mL CTLA4-FasL蛋白浸泡角膜植片组(10只)。术后观察角膜植片的透明情况及角膜植片存活时间；分别在术后不同之间点进行免疫组织化学、RT-PCR、DNA原位末端标记（TUNEL）检查。
结果 A组 角膜植片的存活时间平均为16.3±1.5天，B组 角膜植片的存活时间平均为15.2±2.1天，C组 角膜植片的存活时间平均为14.6±1.2天, D组 角膜植片的存活时间平均为超过90天，E组 角膜植片的存活时间平均为12.9±3.2天；D组角膜植片的存活时间明显长于其他各组（P<0.01）；免疫组织化学检测A组中术后7天角膜植床上皮和虹膜组织中有CD80分子阳性表达。RT-PCR检查术后7天和14天A组中发生排斥的角膜及虹膜组织中均可检测到Fas、CD80、CD86 mRNA表达，而在相同时间点D组中角膜植片未检测到上述分子的表达。A组和D组均未检测到FasL mRNA。TUNEL检查发现经过CTLA4-FasL蛋白浸泡的各组中角膜及虹膜组织中有大量的凋亡细胞阳性表达，而A组中只有少量的凋亡细胞。
结论CTLA4-FasL融合蛋白既能阻断T细胞活化所需的CD28-CD80/CD86第二信号转导途径，又能诱导T细胞凋亡，发挥双重抑制T细胞激活的作用，从而用于预防角膜移植术后免疫排斥反应发生的治疗。CTLA4-FasL融合蛋白的治疗浓度为10ug/mL时，能够有效延长角膜植片的存活时间。
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| 会议投稿录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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