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光催化剂TiO2混悬液对晶状体上皮细胞作用的实验研究
作者:陈迎月  …  文章来源:福建医科大学附属协和医院眼科  350001  点击数2878  更新时间:2005/7/12 13:49:06  文章录入:aya610  责任编辑:毛进
目的:研究光催化剂TiO2混悬液对晶状体上皮细胞(LEC)的作用及其机制,探讨该光催化剂应用于防治后发性白内障的可能性。 方法:1、不同剂量TiO2与牛LEC共同培养,用MTT法绘制生长曲线。用流式细胞仪观察细胞生长周期。2、设定不同剂量TiO2与对照组,以365nm的近紫外光激发TiO2光催化剂。采用MTT、台盼兰、AO-EB、琼脂糖凝胶电泳、电镜等方法观察不同的激发时间TiO2对牛LEC的杀伤效果、作用机制及形态学方面的改变。 结果:1、牛LEC平均生长速度随着TiO2浓度升高而下降,在200ug/mL TiO2组作用48h对生长抑制作用最大。此时细胞生长周期示增殖指数下降,与对照组有显著性差异(P=0.001)。2、在照射强度为0.185±0.055mw/cm2的365nm紫外光激发下TiO2对牛LEC杀伤率随着TiO2浓度增加和照射时间延长而增加。其中在激发30min,40min后150ug/mL TiO2组杀伤率分别为48.96%和50.42%;200ug/mL TiO2组杀伤率分别为43.54%和65.76%而对照组杀伤率分别为29.15%和38.75%。与对照组比较均有显著性差异(P分别为0.001,0.003,0.001和0.000)。200ug/mL TiO2组死亡率分别为(32.58±1.72)%和(57.08±0.94)%而对照组死亡率分别为(20.94±0.43)%和(33.35±1.37)%。不同激发时间两组死亡率比较均有显著性差异(P均为0.000)。激发30min后 200ug/mL TiO2组凋亡率(11.67±1.53)%,死亡率(46.33±1.53)%。而对照组凋亡率(10.33±1.56)%,死亡率(19.33±2.52)%。两组凋亡率比较无显著性差异(P=0.422),死亡率比较有显著性差异(P=0.000)。 3、琼脂糖凝胶电泳示200ug/mL TiO2组经UVA激发30min出现坏死带。激发40min坏死程度加大。同时电镜下见大量细胞有坏死超微结构改变如线粒体嵴断裂,絮状物沉淀;细胞膜破裂等。 结论:1、光催化剂TiO2混悬液可能通过影响细胞周期使细胞凋亡,从而抑制体外牛LEC正常生长。2、365nm紫外光激发下对照组和TiO2组均有杀伤作用。只有TiO2达到一定的浓度或激发足够长的时间,两组才有明显的区别。3、UVA激发TiO2光催化剂对组织的损伤主要以坏死为主。推测可能是TiO2受紫外光激发形成光生电子-空穴对,直接或分别与溶解氧和水作用生成氢氧自由基,超氧自由基和过氧化氢等活性氧类通过一系列自由基链式反应破坏细胞结构。
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