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| 氧化应激对猪眼小梁细胞ELAM-1表达的影响 |
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| 作者：周崎 赵家… 文章来源：中国协和医科大学 北京协和医院眼科,100730 点击数2387 更新时间：2005/7/11 16:01:29 文章录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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| 目的 研究氧化应激对猪眼小梁细胞内皮细胞白细胞黏附分子-1（ELAM-1）表达的影响，了解氧化应激诱导的ELAM-1的表达与IL-1a的关系，试图发现青光眼特异性表达ELAM-1的机制。材料和方法 将原代培养的猪眼小梁细胞血清饥饿培养16小时，分成对照组、H2O2组和白介素受体拮抗剂（IL-1ra）组。IL-1ra组再根据加入IL-1ra的浓度分成若干亚组。对照组用无血清培养基培养，H2O2组用1mM的H2O2刺激，各拮抗剂IL-1ra组先用2ug/ml、8ug/ml、32ug/ml、64ug/ml、180ug/ml和600ug/ml的IL-1ra预处理过夜后，用1mM的H2O2刺激。3 0分钟后用免疫细胞化学法检测小梁细胞ELAM-1的表达；分别提取对照组和H2O2组细胞的总RNA，用RT-PCR法检测IL-1a mRNA的表达，观察小梁细胞表达ELAM-1过程中，内源性IL-1a mRNA水平的改变。结果 在原代培养的猪眼小梁细胞中,对照组ELAM-1表达阴性，H2O2组和2ug/ml、8ug/ml、32ug/ml和64ug/ml浓度的拮抗剂IL-1ra亚组ELAM-1表达阳性，180ug/ml和600ug/ml拮抗剂IL-1ra亚组ELAM-1表达阴性。RT-PCR结果，各组RNA提取质量好，阳性内对照均扩增出片断，实验组除了一个对照组扩增出目的片断，其余均未扩增出目的片断。结论 氧化应激可以诱导猪眼小梁细胞表达ELAM-1。在体外细胞培养体系，高浓度的IL-1ra可以拮抗氧化应激对ELAM-1表达的作用，提示小梁细胞ELAM-1的表达与IL-1a有关。
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