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炎性因子对培养人视网膜色素上皮细胞移行及其细胞内钙离子水平的影响
作者:王海燕,…  文章来源:西安 第四军医大学西京医院眼科,全军眼科研究所 710032  点击数1493  更新时间:2005/7/1 9:09:26  文章录入:aya610  责任编辑:毛进
目的:研究炎性因子(白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TNF-α))作用后,培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞的移行,及细胞内钙离子水平([Ca++]i)的变化;及分别联合白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1rA)、染料木黄酮(genistein)、地塞米松作用后上述指标的变化情况。方法:用环钻和棉签制作一个刮伤模型,观察IL-1β和TNF-α及分别联合IL-1rA、genistein和地塞米松作用下,计数hRPE细胞跨过损伤区的细胞数量;用Fluo-3AM负载hRPE细胞,激光共聚焦显微镜检测[Ca++]i。 结果:IL-1β和TNF-α刺激hRPE细胞移行(图1 ),IL-1rA、genistein和地塞米松均可以抑制IL-1β和TNF-α刺激hRPE移行的能力(图2,3,4)。预处理IL-1β和TNF-α后,刮伤区移行的细胞较对照组细胞内Ca++水平升高,RPE细胞内荧光强度升高约204%(图5,6,7,8); 加入100μg•L-1IL-1rA作用于hRPE,细胞内荧光迅速减弱,至接近基线水平(图9)。100μMgenistein作用后,细胞内荧光迅速减弱,至接近基线水平(图10)。10mg•L-1地塞米松作用后,细胞内荧光减弱,约为对照组的23%(图11)。 结论:炎性因子刺激hRPE细胞移行,并刺激[Ca++]i 水平升高;IL-1rA、genistein和地塞米松可以抑制炎性因子刺激的hRPE细胞移行及[Ca++]i 水平。
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