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川芎嗪对CoCl2诱导的人脐静脉内皮细胞缺氧的作用研究
作者:周焕娇  文章来源:中山大学中山眼科中心,眼科学国家重点实验室  点击数506  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进

目的 观察正常及缺氧条件下川芎嗪对体外培养的人脐静脉内皮细胞凋亡和细胞周期的影响。
方法 原代培养人脐静脉内皮细胞并进行鉴定,取第2-4代的细胞进行实验。利用150μmol/L CoCl2模拟细胞化学缺氧。实验分为对照组、150μmol/L CoCl2缺氧组、50μmol/L TMP组、100μmol/L TMP组及200μmol/L TMP组。TMP组均为150μmol/L CoCl2预处理细胞4小时后加入上述不同浓度的TMP继续作用12小时和24小时。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期情况。
结果 在正常和缺氧培养条件下,加入川芎嗪后细胞活性与对照组相比无明显改变。流式细胞仪检测12小时细胞凋亡率如下:对照组(6.1±1.2)%,CoCl2组为(15.8±4.4)% ,50μmol/L TMP组为(13.7±3.7)%,100μmol/L TMP组为(13.4±3.5)%,200μmol/L TMP组为(11.9±4.1)%,CoCl2组细胞凋亡率为对照组的2.6倍(P=0.07),200μmol/L TMP组使细胞凋亡率减少为CoCl2组的75.3%(P=0.04);24小时细胞凋亡率:对照组(6.1±2.5)%,CoCl2组为(21.0±1.6)% ,50μmol/L TMP组为(13.1±2.3)%,100μmol/L TMP组为(11.2±2.3)%,200μmol/L TMP组为(8.9±1.6)%,CoCl2组细胞凋亡率为对照组的3.4倍(P=0.02),100μmol/L TMP组和 200μmol/L TMP组分别使细胞凋亡率减少为CoCl2组的53.3%(P=0.04)、42.4%(P=0.02)。流式细胞仪检测细胞周期为:与对照组相比,CoCl2作用12小时使G0/G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞明显减少;CoCl2作用24小时可使S期和G2/M期细胞比例显著增加,G0/G1期细胞比例显著降低。与CoCl2组比,12小时TMP各组能逆转CoCl2诱导的HUVECs细胞周期G0/G1期阻滞,使S期比例增加,差异无统计学意义;24小时TMP各组能逆转CoCl2诱导的HUVECs细胞周期S期阻滞,使G0/G1比例增加,各组间差异具有统计学意义(P< 0.05)。
结论 川芎嗪能抑制缺氧培养条件下的脐静脉内皮细胞的凋亡和逆转细胞周期阻滞,使其细胞周期接近正常分布。

 

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