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甲酰钛受体在人RPE细胞的发现及其功能的初步研究
作者:张晓光  文章来源:陕西省眼科研究所  点击数322  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进

目的 确定甲酰肽受体(FPR)在人视网膜色素上皮(hRPE)细胞的表达及定位;观察激活FPR,电场引导hRPE细胞层的移行修复,以及在此过程中细胞间连接mRNA的表达和其超微结构的变化。
方法 应用RT-PCR方法确定hRPE细胞表达FPR,应用免疫荧光三标染色法着染FPR、F-actin以及胞核,从而进一步确定FPR在细胞上的表达与定位。通过激光共聚焦显微镜观察电场作用的hRPE细胞骨架F-actin和FPR的变化及定位关系。显微镜照相系统连续记录每1 h细胞移行的距离和细胞损伤范围的变化。并通过RT-PCR检测细胞间连接mRNA的表达,透射电子显微镜来观察细胞间连接的超微结构改变。
结果 首次确定了hRPE细胞表面存在FPR。同时揭示FPR与F-actin之间存在共定位关系。在电场和FPR的作用下,可以明显促进hRPE细胞层的移行和损伤修复。将hRPE细胞培养于无血清培养液组,20%血清培养液组及FPR经典激活剂fMLF培养液组,电场作用3 h后,hRPE细胞层的移行距离分别为24.262 ± 6.82 µm,40.243 ± 5.069 µm(1.7倍),和56.926 ± 7.821 µm(2.4倍)。在无血清培养液组,20%血清培养液组和fMLF培养液组中可检测出CX-43和ZO-1 mRNA的表达,而E-cadherin mRNA的表达却分别在2 h,30 min和1 h时检测到。透射电镜可以观察到细胞间连接的超微结构。
结论 首次确定hRPE细胞表达FPR,并与细胞骨架F-actin共定位表达,说明FPR的激活与hRPE细胞的移行修复有关。激活hRPE细胞FPR,显著促进了hRPE细胞层在电场作用下的移行。细胞间连接mRNA的表达及其超微结构的观察,说明hRPE细胞层的损伤修复是成层移行的。本研究对FPR的促进损伤修复的作用进行了初步的研究,同时为hRPE损伤性疾病的治疗,提供新的治疗途径。

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