题目:野生型和突变型Myocilin原核表达载体的构建
作者:卓业鸿,李亮,段山,李轶擎
单位.城市:中山大学中山眼科中心 广东省广州市先烈南路54号 510060
目的:构建野生型和P370L突变型Myocilin原核表达载体,为野生型和P370L突变型Myocilin基因及蛋白功能研究提供研究基础。
方法:应用PCR扩增已成功构建的真核载体上相关目的基因,利用酶切、连接等基因工程方法将目的基因连接到目标载体pGEX-4T-1上。
结果:经克隆、测序证实pGEX-4t-1/E-w和pGEX-4t-1/E-370重组载体开读框(ORF)无移码突变,完全正确。目的基因MYOC-E-w cDNA序列和MYOC-E-370 cDNA序列除370突变外无任何突变,完全正确。
结论:pGEX-4t-1/E-w和pGEX-4t-1/E-370原核重组载体构建成功,为下一步成功表达、纯化野生型和P370L突变型Myocilin蛋白并研究其结构、功能等奠定了实验基础。
|