| 目的：通过体外试验，观察重组重组人α防御素－3前体蛋白对于克雷柏菌、大肠杆菌、假单胞杆菌核表皮葡萄球菌的杀菌效果；同时，判断人α防御素－3前体蛋白与链霉素、氨苄青霉素是否对大肠杆菌存在协同杀菌作用。探讨防御素的眼表抗菌活性。
方法：大肠杆菌和克雷伯菌再0～100ug/mL范围内浓度分别为5ug/mL和10ug/mL递增，假单胞杆菌和表皮葡萄球菌在0～120ug/mL范围内蛋白浓度以20ug/mL递增，使用不同浓度的重组人α防御素3前体蛋白进行实验，根据在不同蛋白浓度下生存下来细菌所占的比例以及导致50％，90％和99％细菌死亡时重组人α防御素3前体蛋白浓度（LD50,LD90和LD99）来判断前体蛋白的杀菌作用。此外，分别单用α防御素3前体蛋白（浓度10ug/ml）、链霉素（10ug/ml）和氨苄青霉素（20ug/ml），以及前体蛋白分别与这两种抗生素以相同浓度混合使用，进行大肠杆菌抗菌试验，采用克隆计数法鉴定杀菌效果。
结果：重组人α防御素3前体蛋白对大肠杆菌DH5α，蛋白浓度为10、20、30和45 ug/ml时，细菌存活率分别为50％、10％、5％和1％；对于克雷伯菌，蛋白浓度为5、10、15和30 ug/ml时，细菌存活率分别为50％、33％、10％和4％。而对于假单胞杆菌，蛋白浓度为25、53、60和84 ug/ml时，细菌存活率分别为50％、10％、5％和1％；对于表皮葡萄球菌，重组人α防御素3前体蛋白各浓度下，细菌存活率均大于85％。使用10 ug/ml人α防御素3前体蛋白和10 ug/ml链霉素后，大肠杆菌存活率分别为53％和36％；二者合用，细菌存活率降至8％；而单用20 ug/ml 氨苄青霉素，大肠杆菌存活率为9％，与10 ug/ml人α防御素3前体蛋白合用，细菌存活率仅为53％。
结论：重组人α防御素3前体蛋白在体外可有效杀伤大肠杆菌DH5α、克雷伯菌和假单胞杆菌，与链霉素存在协同杀菌作用，为其进一步应用于眼部感染的预防与治疗提供依据。 |
