目的:研究程序化降温和传统深低温保存角膜缘组织对干细胞活性的影响,探讨程序化降温保存角膜缘组织进行角膜缘干细胞移植的可能性。方法:分别使用程序化降温仪及传统液氮深低温保存同一供体双眼角膜缘组织2个月,正常复苏后制成标本,采用免疫组化P63蛋白抗体检测干细胞的存活数量,并采用同样方法检测新鲜供体角膜缘组织干细胞数量。使用图像分析软件分别计数三次检测得的角膜缘组织干细胞数量。结果:1.使用程序化降温保存的角膜缘组织干细胞存活数量低于新鲜供体的角膜缘组织的干细胞数量,两者相比具有显著差异。2.使用程序化降温保存的角膜缘组织干细胞存活数量高于传统深低温保存的角膜缘组织的干细胞数量,两者相比具有显著差异。结论:1.深低温保存的角膜缘组织由于冷冻损伤,存在部分干细胞死亡。2.程序化降温保存的角膜缘组织干细胞存活数量低于新鲜供体角膜,比传统深低温保存的角膜缘干细胞更具有临床应用价值。
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