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色素上皮衍生因子基因转染抑制激光诱导的脉络膜新生血管的实验研究           
色素上皮衍生因子基因转染抑制激光诱导的脉络膜新生血管的实验研究
作者:张新秀 何… 文章来源:吉林省长春市自由大路2号中国人民解放军第461医院 眼科 130021 点击数: 更新时间:2006-6-6 16:34:23
目的:探讨PEDF-GFP基因转染对氪激光诱导的BN大鼠CNV的发生,发展过程的影响。方法:1.24只BN大鼠按数字随机分为6组,以脂质体介导的方法将重组表达质粒PEDF-GFP经玻璃体腔注射入BN大鼠眼内。在注射后1d、1w、2w、3w、4w分别用荧光显微镜观察GFP表达情况,用RT-PCR方法检测PEDF表达情况。2.48只BN大鼠行氪激光光凝诱导脉络膜新生血管,然后按数字随机分组为PEDF组、脂质体组和对照组。光凝后1w、2w、3w、4w分别行眼底血管荧光造影、脉络膜血管铺片、病理学检查,及PECAM-1表达的免疫组化检测,评价PEDF基因转染对氪激光诱导的CNV发生,发展过程的影响。结果:1.玻璃体注射脂质体介导的PEDF-GFP质粒后1d均可见明显的绿色荧光分布于视网膜全层,1周时表达更强,2周和3周时荧光强度比1周增强,荧光范围也有所扩大,可以持续表达4周。RT-PCR反应可以检测到转染后第1天PEDFmRNA表达就较对照组增强,第1周和第2周表达强度更高,到第4周注射组的视网膜组织中PEDFmRNA仍有较高水平的表达。2.PEDF组在每个时间点的荧光素渗漏范围均明显小于脂质体组和对照组。PEDF组光凝后4周,光凝区内增殖的RPE细胞、成纤维细胞和新生血管较少。3组光凝区均可见PECAM-1阳性表达,但PEDF组与对照组和脂质体组比较差异有显著性。PEDF组在每个时间点的CNV面积与对照组和脂质体组比较差异均有显著性。结论:玻璃体腔注射脂质体和质粒复合物能有效地转染视网膜全层,并可以持续表达。PEDF基因转染可以显著抑制氪激光诱发的BN大鼠的CNV。
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