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角膜缘上皮干细胞体外培养的形态学及功能研究         
角膜缘上皮干细胞体外培养的形态学及功能研究
作者:王丽娅 文章来源:河南省眼科研究所、河南省角膜病重点实验室 点击数: 更新时间:2008-1-13
角膜缘上皮干细胞体外培养的形态学及功能研究
王丽娅 赵承彦 庆慧玲 杜连心
河南省眼科研究所、河南省角膜病重点实验室(河南省郑州市纬五路7号,郑州 450003)
目的 通过体外组织培养,观察角膜上皮干细胞增殖、分化与成膜过程及其在维持角膜上皮细胞均一性中的作用 。方法 以兔眼角膜—结膜分界线为基准,向内切取宽2mm、深1mm的角膜缘组织条带,分成1mm×2mm小块,移至不同载体上培养。相差显微镜跟踪观察角膜上皮干细胞增殖、分化与成膜情况。结果 1. 角膜上皮干细胞自角膜缘组织中游离出来后,呈现多种形态,最先分泌大量的角蛋白,形成平整、均匀的透明膜片;3-4周后,分化成柱状细胞,停止分泌角蛋白,浮出膜面,密集排列。角膜上皮细胞的增殖周期有限,通常可以传代15-20代。 2.角膜缘组织培养形成的膜都是均质、透明的,膜上除了有同一组织来源的上皮细胞外,没有异质细胞或杂质。膜在形成、增长和扩展过程中如遇到成纤维细胞(同组织来源)或异质细胞(如羊膜上皮细胞),成膜细胞分泌角蛋白并释放出某种理化成分(未鉴定)使之受损,受损细胞先收缩,继而细胞膜破裂,细胞内出现颗粒和纤维化,最后消失。完成这一过程之后,膜继续扩展,保持膜的平整、光滑、透明。结论 角膜上皮干细胞在成膜过程中可分泌大量的角蛋白,并具有化解异质细胞,保持膜均质、透明状态的生理特性。
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